Комбинированное действие биологически активных соединений на состояние ядра и хроматина клеток буккального эпителия человека 5.3.1. Действие ДНК-связывающихся препаратов в присутствии C60 фуллерена
Согласно полученным в подразделе 4.2 данным, в качестве оптимальных условий для проведения экспериментов в присутствии фуллерена С60 и CAF можно выбрать следующие концентрации: 5 10-6 моль/л для DOX и 110-5 моль/л для EB и PF и время экспозиции 1 час.
При указанных концентрациях действующих веществ наблюдаются максимальные изменения параметров КГГ и ЭОЯ, практически мало меняющиеся при временах экспозиции более 1 часа. Исследовалось изменение показателей КГГ и ЭОЯ в клетках буккального эпителия человека в системе Препарат-С60 фуллерен в зависимости от концентрации фуллерена. В качестве позитивного контроля рассматривались клетки, которые инкубировались только в растворе препарата; в качестве негативного контроля - клетки, содержавшиеся без препарата и С60 фуллерена.Результаты измерений для каждой комбинации препаратов DOX-C60, EB- C60 и PF-C60 представлены на рис. 5.1-5.3 (средние значения показателей ± стандартная ошибка среднего), а также в таблицах В.1-В.3 в Приложении В.
Рисунок 5.2. Влияние EB на состояние ядра (ЭОЯ) и хроматина (КГГ)
буккального эпителия человека в присутствии C60 фуллерена
В целом, наиболее важным результатом, вытекающим из анализа полученных данных, является ярко выраженная зависимость реакции клеточного ядра на присутствие С60 фуллерена в системе. Как и ранее для случая индивидуального действия веществ (см. подраздел 4.2), изменения измеряемых показателей оказываются качественно подобными для различных препаратов и доноров. Установлено, что для каждого препарата наблюдается снижение КГГ от позитивного контроля к негативному с увеличением концентрации С60 фуллерена, что свидетельствует о восстановлении функциональной активности ядра в его присутствии. При этом диапазон изменения значений показателя КГГ в среднем в два раза выше, чем показателя ЭОЯ, что указывает на большую чувствительность фактора изменения структуры гетерохроматина, чем электроотрицательности ядра, к действию комбинаций веществ.
Установлено, что показатель ЭОЯ проявляет отрицательную корреляцию (в диапазоне -0.8..0.9) с показателем КГГ для всех доноров и веществ. Подобная связь между состоянием хроматина и ЭОЯ была выявлена ранее в главе 4. Следует также отметить, что характер наблюдаемых эффектов не зависит от индивидуальных особенностей клеток доноров, принимавших участие в эксперименте, и отражает общую для них тенденцию действия комбинаций веществ.
5.3.2.